Назначение набора DiamondDNAtm
Набор предназначен для выделения геномной ДНК из пищевых продуктов и кормов.
Принцип выделения ДНК с помощью DiamondDNAtm
Методика выделения ДНК из растений и их дериватов с помощью DiamondDNA включает в себя лизис тканей в лизирующем буфере, сорбцию ингибиторов ферментативных реакций из раствора и осаждение ДНК из раствора с помощью высокоэффективного осадителя ДНК.
В отличие от широко используемых методов и наборов, основанных на сорбции молекул ДНК на частицах оксида кремния (в виде суспензии или микроколоночном исполнении), очистка ДНК с использованием набора DiamondDNA исключает сильную деградацию молекул нуклеиновых кислот. В результате длина фрагментов составляет более 20 000 пар нуклеотидов.
Использование дополнительной стадии осаждения примесей позволяет еще более повысить качество очистки. В процессе использования DiamondDNA не происходит непосредственное взаимодействие молекул ДНК с сорбентом, что позволяет сохранить целостность двойной спирали. Случайное попадание сорбента в ПЦР-смесь не блокирует амплификацию. Использование протеазы необязательно и оправдано при выделении ДНК из сильно деградировавшего материала.
Выделенная с помощью DiamondDNA ДНК пригодна для дальнейшего гибридизационного анализа, постановки ПЦР и секвенирования.
Принципиальная простота и низкая продолжительность процесса выделения и очистки ДНК достигается применением селективного сорбента, являющегося продуктом разработки оборонных предприятий. Применяется высокоэффективная селективная адсорбция примесей, обеспечивающая в результате уникальные показатели чистоты ДНК (OD260/OD280 не менее 1,8). Примеси протеинов в очищенной ДНК невозможно идентифицировать с помощью методов дифференциального окрашивания и последующей флуориметрии. При использовании DiamondDNA достигается высокая степень очистки от таких сильных ингибиторов ПЦР как полифенолы и полисахариды. Содержание ДНК в растворе после очистки прямо пропорционально содержанию нуклеиновых кислот в исходном объекте, что повышает достоверность при использовании количественных методов анализа (RealTime-ПЦР и детекции по конечной точке).
В наборе отсутствуют токсичные вещества и запрещенные к свободному обороту компоненты.
Набор предназначен для научных исследований и может быть использован широким кругом пользователей, в том числе для общеобразовательных целей.
Протокол выделения ДНК из продуктов питания и кормов