Назначение набора DiamondDNAtm
Набор предназначен для выделения тотальной РНК из живых тканей (проростки, участки живых побегов или корней).
В отличие от широко используемых методов и наборов, основанных на токсичных веществах вроде фенола и хлороформа, набор DiamondDNA не содержит высокотоксичных веществ. Кроме того, набор позволяет выделять РНК из растительных объектов с высоким содержанием полисахаридов, которые, в случае использования методов на основе кислого фенола, выделяются вместе с нуклеиновыми кислотами и осложняют дальнейшую очистку, хранение и исследование.
Входящие в состав набора буферы позволяют выделять препараты РНК в высокой концентрации без примесей высокомолекулрной ДНК. Выделенная с помощью DiamondDNA РНК пригодна для дальнейших операций гибридизации, транскрипции и ПЦР.
Принцип выделения РНК с помощью DiamondDNAtm
Методика выделения РНК из растений с помощью DiamondDNA включает в себя лизис тканей в лизирующем буфере, денатурацию протеинов, ДНК и РНКаз, осаждение и очистка препарата РНК.
Принципиальная простота и низкая продолжительность процесса выделения и очистки РНК достигается использованием селективного солевого буфера, являющегося продуктом разработки оборонных предприятий. При соблюдении протокола выделения обеспечивается высокая чистота препарата РНК (OD260/OD280 не менее 1,8) для последующего проведения обратной транскрипции.